2024/11/22
在细胞培养的小宇宙中,每个细胞都有自己的“小情绪”,生长状态不佳、活力不足,或许只是因为没有找到最合适的血清。别担心,今天我们就来聊聊如何安抚细胞的“小情绪”,揭秘血清选择的秘诀,让您在细胞培养的路上无忧前行!
细胞“挑食”,血清是关键
血清,作为细胞培养基的重要组成部分,富含生长因子、激素、贴壁因子等关键营养素,是细胞健康生长与增殖的基石。但你知道吗?不同来源、不同品质的血清,对细胞的影响可是天差地别!就像人一样,吃对了食物,才能精神饱满、活力四射;细胞也是如此,选对了血清,才能茁壮成长、繁殖迅速。
如何选择合适的血清
根据实验需求选择血清类型
细胞类型:不同类型的细胞对血清的要求不同。例如,干细胞、淋巴细胞、神经细胞等通常需要使用胎牛血清,而肿瘤细胞则可能使用小牛血清即可。
图1 HyClone胎牛血清培养干细胞
实验目的:根据实验目的,选择适合的血清。如果实验需要高浓度的生长因子,那么可能需要选择含有丰富生长因子的血清。
考虑血清的质量因素
产地与来源:选择来自合法且正规途径的血清。我国对于动物源制品的进口有严格的规定,目前批准进口的胎牛血清来源主要是澳大利亚、新西兰和乌拉圭。因此,在选购进口产品时,要规避选取来源为禁止输入国家的相关产品。
质量认证:合格的血清需要经过严格的多重质检和验证,确保不含有有害微生物,如细菌、真菌、支原体、病毒等。同时,血清也必须通过各种性能测试实验。
批次稳定性:由于血清制品来源于天然活体,供体牛的生理状况、健康状况均不同,因此批间差异在所难免。但是,选择批次差异小的血清可以保证血清质量,确保细胞培养效果,并减少由于批间差异带来的使用前测试。
血清使用中的常见问题
血清中的沉淀是什么,是否会影响细胞生长?
血清中的沉淀通常包括胆固醇、蛋白沉淀、纤维蛋白和磷酸钙等物质。这些沉淀物在血清中可能以不同的形态存在,如絮状纤维蛋白或小黑点样的磷酸钙。多数研究和实验经验表明,血清中的沉淀物不会对细胞的正常生长产生显著影响。
图2 血清中的沉淀
如何进行血清的梯度替换
当细胞培养需要更换血清品牌时,需要考虑细胞的适应过程。不同品牌的血清所含成分有一定差异,血清更换会使细胞发生不适,从而出现细胞增殖缓慢或细胞状态不佳等情况。血清梯度替换的一般流程为:先用20%新血清与80%原血清进行混合,培养传代1-2次;之后用50%新血清与50%原血清混合培养传代;再用80%新血清与20%原血清混合培养传代;最后完全使用新血清培养传代。
HyClone胎牛血清:细胞培养的
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